우유 샘플에서 테트라사이클린 항생제 잔류물을 측정하기 위한 정성적 면역분석법에 이어 정량적으로 개선된 HPLC

Scientific Reports 12권, 기사 번호: 14502(2022) 이 기사 인용

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환경 오염 물질은 사람과 야생 동물에게 해를 끼치는 여러 문제 중 하나입니다. 현재 새롭게 등장하는 오염 물질의 예로는 물과 식품에 존재할 수 있는 항생제 잔류물이 있습니다. 항생제는 인간과 동물의 감염을 치료하거나 예방하기 위한 것이지만, 성장과 사료 효율성을 촉진하는 능력 때문에 동물성 식품 보충제로도 사용되어 왔습니다. 이러한 항균제의 남용으로 인해 식품에 항생제 잔류물이 축적되어 결국 인간이 섭취하게 됩니다. 동물의 직접 만남이나 젖을 통해, 또는 식물이나 토양을 통해 간접적으로 항생제에 인간이 지속적으로 불필요하게 노출되면 다제내성균이 출현할 확률이 높아져 결과적으로 인간의 건강에 악영향을 미칠 수 있습니다. 항생제 사용에 관한 새로운 규정이 부과되었습니다. 사우디아라비아에서 인간이 소비하도록 의도된 다양한 유형의 식품에서 항생제 잔류 조건에 관한 데이터가 부족하기 때문에, 이 연구에서는 최적화된 크로마토그래피 방법(HPLC-DAD)과 동물 우유 샘플에서 테트라사이클린 항생제를 특이적으로 검출하기 위한 면역분석 접근법을 제안했습니다. 이 방법은 pH 4로 조정된 0.01 M KH2PO4:아세토니트릴:메탄올(70:20:10, v/v/v)로 구성된 이동상을 갖춘 RP-C18 컬럼을 사용하여 수행되었습니다. 방법에서 개선 사항이 관찰되었습니다. 해상도와 감도. 추출에 사용된 단백질 침전 방법은 85~101%의 높은 회수율을 보여주었습니다. 이 방법은 국제 조화 회의(ICH)의 지침에 따라 검증되었습니다. 이러한 조사 결과를 통해 사우디 시장의 유제품에 함유된 테트라사이클린 및 옥시테트라사이클린 항생제 잔류물이 최대 잔류 한계(MRL) 미만이라는 것이 명백히 드러났습니다.

환경 오염은 현 세기에 세계가 직면하고 있는 과제입니다. 이 문제는 "일반적인 환경 과정에 부정적인 영향을 미칠 정도로 지구/대기 시스템의 물리적 및 생물학적 구성 요소가 오염되는 것"으로 정의됩니다1. 자연 수준 이상으로 존재하는 물질이나 에너지는 오염물질로 간주됩니다1. 항생제 잔류물은 동물, 식물 또는 토양에 존재할 수 있는 환경 오염물질의 한 형태이며 미생물 저항성의 발달을 촉진할 수 있습니다. 항생제의 불필요한 사용 및 노출로 인해 발생하는 미생물 저항성은 소위 다제내성 병원체라고 불리는 특정 항생제, 항생제 종류 또는 여러 종류의 항생제에 반응하여 세균 저항 기전의 변화 또는 새로운 기전의 발달로 정의됩니다. MDR)2. 항균 활성을 보존하기 위해 규제 당국은 항생제 처방 과정을 제한했습니다. 그러나 항생제는 수의학에서의 사용 외에도 소와 가금류의 성장을 촉진하고 생산성을 향상시키기 위해 식품 방부제로도 사용됩니다3,4,5. 이전 연구에 따르면 동물 생산성을 높이기 위해 높은 수준의 항생제를 사용하는 것은 동물성 식품에 항생제 잔류물이 존재하는 것과 관련이 있는 것으로 나타났습니다6,7,8. 인간이 항생제 잔류물에 지속적으로 노출되면 인간에게 해로울 수 있으며 알레르기 반응이 발생할 가능성이 증가하고 정상적인 장내 세균총이 파괴될 수 있으며, 항생제 내성 박테리아(ARB) 또는 항생제 내성 유전자(ARG)가 동물에서 인간으로 옮겨질 수 있습니다5.

테트라사이클린(TTR), 클로르테트라사이클린(CTC) 및 옥시테트라사이클린(OXY)은 효율성과 저렴한 비용으로 인해 축산업에서 가장 일반적으로 사용되는 항생제 중 하나입니다9,10. 많은 연구에서 전 세계적으로 이러한 항생제의 부적절한 사용과 그러한 관행의 결과가 입증되었습니다6,11. 예를 들어, 동물의 혼합 사료나 식품 산업의 방부제로 항생제가 통제되지 않고 사용됩니다12,13. 또한 신선한 고기의 저장 기간을 늘리기 위해 도살 직전에 항생제를 동물에게 먹이거나 도살 직후 경동맥에 주입하는 경우가 많습니다12. 결국 잔류 항생제 농도는 유럽연합(EU)과 세계보건기구(WHO)가 허용하는 최대 잔류 한계(MRL)를 초과할 수 있습니다.

98.00%), chlortetracycline (> 95.00%) and the internal standard ornidazole (ORZ, > 99.00%) were purchased from Haoyuan ChemExpress Co., Ltd. (Shanghai, China). Potassium dihydrogen orthophosphate anhydrous (KH2PO4) was obtained from Loba Chemie Pvt. Ltd. (Mumbai, India). Ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt dihydrate (Na2EDTA) was obtained from Sigma–Aldrich Chemie Gmbh (Steinheim, Germany). Orthophosphoric acid (H3PO4) was obtained from Avonchem Ltd. (Cheshire, UK). The acetonitrile and methanol solvents in the mobile phase were of UHPLC and HPLC grade. Deionized water was used in all experiments. Milk samples were purchased from multiple local markets and farms in the city of Riyadh. Tetracycline Rapid Immunoassay test kits were obtained from Meizheng Biotech Group, a PerkinElmer company (Beijing, China). The HPLC system (Waters, Milford, MA, USA) consisted of a Waters 1525 binary HPLC pump, a Waters 2998 photodiode array detector, and a Waters 2707 autosampler. The data were acquired and processed using Waters Empower 3 software./p> 0.9998 for each drug, showing that the method is linear in the specified range. The concentrations used for the calibration curve were 0.09, 0.3, 0.5, 0.7, and 1 µg/mL./p>